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組培中培養物的不良表現、可能原因及改進(jìn)措施詳解

導讀:組培過(guò)程中或多或少會(huì )出現培養物不良癥狀,本文列出一些常見(jiàn)的癥狀以及產(chǎn)生的原因,并給出改進(jìn)的措施。

初代培養階段:?jiǎn)?dòng)與脫分化

不良表現:培養物水浸狀、變色、壞死、莖斷面附近干枯

可能原因:表面滅菌劑過(guò)烈,時(shí)間過(guò)長(cháng);外植體選用部位不當;時(shí)期不當;

改進(jìn)措施:試用較溫和的滅菌劑,降低濃度,減少時(shí)間。試用其他部位;改在生長(cháng)初、中期采樣。

不良表現:培養物長(cháng)期培養沒(méi)有多少反應

可能原因:生長(cháng)素種類(lèi)不當;用量不足;溫度不適宜;培養基不適宜

改進(jìn)措施:增加生長(cháng)素用量,試用2,4-D;調整培養溫度

不良表現:愈傷組織生長(cháng)過(guò)旺,疏松,后期水浸狀

可能原因:生長(cháng)素及細胞分裂素用量過(guò)多;培養溫度過(guò)高;培養基滲透勢低

改進(jìn)措施:減少生長(cháng)素、細胞分裂素用量,適當降低培養溫度

不良表現:愈傷組織生長(cháng)過(guò)緊密、平滑或突起,粗厚,生長(cháng)緩慢

可能原因:細胞分裂素用量過(guò)多;糖濃度過(guò)高;

改進(jìn)措施:適當減少細胞分裂素和糖的用量

不良表現:側芽不萌發(fā),皮層過(guò)于膨大,皮孔長(cháng)出愈傷組織

可能原因:采樣枝條過(guò)嫩;生長(cháng)素、細胞分裂素用量過(guò)多

改進(jìn)措施:減少生長(cháng)素、細胞分裂素用量,采用較老的枝條

繼代培養階段:再分化與叢生芽苗增殖

不良表現:苗分化數量少,速度慢,分枝少,個(gè)別苗生長(cháng)細高

可能原因:細胞分裂素用量不足;溫度偏高;光照不足;

改進(jìn)措施:增加細胞分裂素用量,適當降低溫度,增加光照時(shí)間

不良表現:苗分化較多,生長(cháng)慢,部分苗畸形,節間極度短縮,苗叢密集,過(guò)度微型化

可能原因:細胞分裂素用量過(guò)多,溫度不適宜

改進(jìn)措施:減少或停用一段時(shí)間細胞分裂素,調節適當溫度

不良表現:分化出苗較少,苗畸形,培養較久的苗可能再次愈傷組織化

可能原因:生長(cháng)素用量偏高,溫度偏高

改進(jìn)措施:減少生長(cháng)素用量,適當降溫

不良表現:葉粗厚變脆

可能原因:生長(cháng)素用量偏高,或兼有細胞分裂素用量偏高

改進(jìn)措施:適當減少激素用量,避免葉接觸培養基

不良表現:再生苗的葉緣、葉面等處偶有不定芽分化出來(lái)

可能原因:細胞分裂素用量過(guò)多,亦或該種植物適宜這種再生方式

改進(jìn)措施:適當減少細胞分裂素用量,或分階段利用利用這一再生方式

不良表現:叢生苗過(guò)于細弱,不適宜生根操作和將來(lái)移栽

可能原因:細胞分裂素用量過(guò)多,溫度過(guò)高,光照短,光強不足,久不轉接,生長(cháng)空間窄

改進(jìn)措施:減少細胞分裂素用量,延長(cháng)光照,增加光強,及時(shí)轉接繼代培養,降低接種密度,改善瓶口遮蔽物

不良表現:常有黃葉、死苗夾于叢生苗中,部分苗逐漸衰弱,生長(cháng)停止,草本植物有時(shí)水浸狀、燙傷狀

可能原因:瓶?jì)葰怏w狀況惡化,pH值變化過(guò)大;久不轉接,糖已耗盡,光合作用不足以維持自身;瓶?jì)纫蚁┖可?;培養物可能已經(jīng)污染,溫度不適

改進(jìn)措施:部分措施同上,去除污染,控制溫度

不良表現:幼苗生長(cháng)無(wú)力,陸續發(fā)黃落葉,組織水浸狀、煮熟狀

可能原因:部分原因同上;植物激素配比不適,無(wú)機鹽濃度不適等

改進(jìn)措施:部分措施同上,及時(shí)繼代培養,適當調節激素配比

不良表現:幼苗淡綠,部分失綠

可能原因:忘記加鐵鹽或者量不足;pH值不適,鐵、錳、鎂元素配比失調,光過(guò)強,溫度不適

改進(jìn)措施:仔細配制培養基,注意配方成分,調好pH值,控制光溫條件

誘導生根階段

不良表現:培養物久不生根,基部切口沒(méi)有適宜的愈傷組織生長(cháng)

可能原因:生長(cháng)素種類(lèi)不適宜;用量不足;生根部位通氣不良;基因型影響,生根程序不適當,pH值不適;無(wú)機鹽濃度及配比不當等

改進(jìn)措施:改進(jìn)培養程序,選用貨增加生長(cháng)素用量,改用濾紙橋液培生根

不良表現:愈傷組織生長(cháng)過(guò)大過(guò)快,根部腫脹或畸形,幾條根并聯(lián)貨愈合;苗發(fā)黃,受抑制或死亡

可能原因:生長(cháng)素種類(lèi)不適,用量過(guò)高;或伴有細胞分裂素用量過(guò)高,程序不適等

改進(jìn)措施:減少生長(cháng)素或細胞分裂素用量,改進(jìn)培養程序等

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