三色堇（Viola tricolor L.）是堇菜科堇菜屬多年生草本花卉，常作二年生栽培，是花壇常用花卉之一。

本項研究針對三色堇組培過(guò)程中的關(guān)鍵環(huán)節進(jìn)行了研究，以期為三色堇的種質(zhì)資源保存、新品種工廠(chǎng)化繁殖推廣及遺傳轉化奠定基礎。

1 材料與方法

1.1 外植體材料及培養條件

1.1.1 外植體選擇

三色堇品種大花黃(B1H)，選擇生長(cháng)健壯、無(wú)病蟲(chóng)害的植株作為試材，采取其幼嫩的頂芽作為外植體。

1.1.2 材料預處理及消毒

幼嫩的頂芽采集后，先用清水沖洗干凈。在無(wú)菌室內用70％酒精消毒15秒，再用0.1％升汞（HgCl2）消毒5分鐘，無(wú)菌水反復沖洗5-6次。

1.1.3 培養條件

培養溫度(23±2)℃，光照時(shí)間16小時(shí)/天，光照強度2000lx。

2 結果與分析

2.1 初代誘導培養

將處理好的外植體接種誘導培養基后，頂芽生長(cháng)很快。14天后從原來(lái)的1.5厘米長(cháng)高到4-5厘米，生長(cháng)比較健壯，頂部的葉片隨之長(cháng)大，不斷有新葉長(cháng)出。

2.2 繼代增殖培養

將初代培養的頂芽切下接入繼代增殖培養基，大約10天后分化出側枝。側枝生長(cháng)很快，10天側枝能長(cháng)高2厘米，30天后就能長(cháng)滿(mǎn)整個(gè)三角瓶。

2.3 生根培養

將增殖培養后的無(wú)根苗接種到生根培養基，從試驗過(guò)程來(lái)看，三色堇生根較困難，需要時(shí)間較長(cháng)，至少30天才能看到少許根長(cháng)出。

3 討論

對多數一、二年生草花來(lái)說(shuō)，以幼嫩的組織和器官 很好。本研究的結果顯示，三色堇幼嫩的頂芽是比較容易組培成功的外植體。

本研究也表明在生根培養方面還有不足之處，有待改進(jìn)以期獲得更好的快繁效率。

附配方

誘導培養基：MS + 6-BA 2mg/L + NAA 0.2mg/L

增殖培養基：MS + 6-BA 1mg/L + NAA 0.02mg/L

生根培養基：1/2MS + NAA 0.1mg/L

以上配方均含3%蔗糖和0.7%瓊脂，pH值5.8-6.0。