紅花鐵線(xiàn)蓮（Clematis coccinea）為毛食科鐵線(xiàn)蓮屬藤本植物，具有較高的觀(guān)賞價(jià)值，也是 好的垂直綠化材料。

本文主要介紹以鐵線(xiàn)蓮莖為外植體，進(jìn)行愈傷組織誘導和植株再生，以及利用試管腋生枝的切段培養，從而獲得大量分化苗的快速繁殖方法。

1 材料與方法

1.1 外植體材料及培養條件

1.1.1 材料預處理

選用嫩莖為外植體，將材料用清水沖洗干凈。

1.1.2 外植體消毒

將干凈的外植體置于超凈工作臺上，先用70%酒精浸數秒鐘，沖洗后放人10%次氯酸鈉溶液中消毒15分鐘，再用無(wú)菌水沖洗3-4次，然后莖切成5-7毫米左右小段，備用。

1.1.3 培養條件

培養溫度26℃，光照時(shí)間為12小時(shí)/天，光強1500-2000lx。

2 結果與分析

2.1 初代培養

將處理好的外植體接種到誘導培養基（配方見(jiàn)文末，下同）上，7天后莖段開(kāi)始腫大，10天后在莖段切口處出現淡黃色愈傷組織，質(zhì)地松軟，增殖較快，并且極易形成叢生芽，因此可產(chǎn)生許多小植株。

2.2 增殖繼代培養

當把小植株切下后，將這些已分化的愈傷組織經(jīng)切割后，轉入新鮮增殖培養基（與誘導培養基相同）。

一個(gè)月左右在原較疏松的愈傷組織上出現1至數個(gè)表面光滑的瘤狀突起，數天后分化出綠色葉尖，而后逐漸發(fā)育成許多正常的綠芽。

初期小芽生長(cháng)緩慢，后生長(cháng)較快，20天后就可長(cháng)成2-3厘米高的叢生小植株。這樣通過(guò)愈傷組織的繼代培養，就可不斷地獲得大量的分化苗。

為了避免由于愈傷組織長(cháng)期繼代培養可能引起的遺傳性變異，也可通過(guò)腋生枝的切段培養，進(jìn)行快速繁殖。

將離體小植株，切成小段，每段上具有一對腋芽，接種在增殖培養基上，一星期左右側芽即萌動(dòng)，一個(gè)月對生側芽就可長(cháng)成具有3-4個(gè)莖節的小植株，然后再切段培養。

2.3 生根培養

當小植株生長(cháng)到1.5-2厘米時(shí)，由基部切下，接種在生根培養基內，20天左右就可產(chǎn)生不定根，一個(gè)月后就可移栽土壤中。

2.4 移栽

離體小植株的移栽，按照常規試管苗移栽方法和栽后管理極易成活。

3 結論

試驗證明:鐵線(xiàn)蓮嫩莖的離體培養，愈傷組織誘導頻率高，分化苗增殖系數大，小植株生長(cháng)快。而鐵線(xiàn)蓮試管腋生枝切段培養不僅大大提高了繁殖速度，而且可以為實(shí)行系列化快速繁殖系統，常年提供大 很完整植株。

附配方

誘導培養基：MS+KT 2mg/L+IAA 0.1mg/L

增殖培養基：MS+KT 2mg/L+IAA 0.1mg/L

生根培養基：1/2MS+NAA 0.1mg/L+IBA 0.1mg/L

以上培養基均加2%的蔗糖和0.7%的瓊脂，pH5.8。

來(lái)源出至微信公眾號：zupeiquan